柑桔黄龙病病原培养及免疫诊断

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  该技术针对柑桔的毁灭性病害黄龙病,对黄龙病类细菌进行分离培养,研制半合成培养基的配方,制定了从病叶叶脉分离 BLO的培养方法,建立了BLO分离培养技术。用人工培养的 BLO活菌或 BLO蛋白免疫小鼠(或家兔)制得单克隆抗体及免疫血清,并创立了下列4种免疫诊断方法:①酶联免疫吸附分析法(ELISA),即用辣根过氧化物酶标记单克隆抗体,以联苯二胺为显色剂,将柑桔叶子的匀浆作材料,3天内可得正确结果;②酶标免疫定位法,即用辣根过氧化物酶标记单克隆抗体,以联苯二胺为显色剂,将柑桔叶子的叶脉徒手切片作材料,此法为定性分析, l.5天内可得结果;②荧光抗体检验法,即用培养病原的免疫血清或单克隆抗体作第一抗体,以异硫氰荧光素(FITC)标记的IgG(羊抗鼠或羊抗兔)作第二抗体,将柑桔叶子的叶脉作徒手切片为材料,此法属定性分析方法;④胶体金一银标记免疫检测法,即用胶体金标记免疫血清或单克隆抗体,以硝酸银作染色剂,将柑桔叶子的叶脉徒手切片作材料,也属定性分析方法,在6小时内完成检测。上述技术实现了柑桔发病前的预知诊断,防止了病害流行,提高了果树的生产能力。  


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