人工催产的雌蟾蜍可让其与雄蟾蜍抱对后产卵受精,也可以通过人工授精的方法,使成熟的卵子和精子结合,完成受精过程。
人工授精一般在药物催产后 25 一 40小时,通过挤压雌蟾蜍腹部能排出卵子时进行。
1.制备精液悬浊液
① 将雄蟾蜍杀死或麻醉,用剪子和镊子剖开其腹部,取出精巢。
② 将精巢轻轻地在滤纸上滚动除掉粘在上面的血液和其他结缔组织。
③ 在经消毒处理的研钵火培养皿中把精巢剪碎,每对精巢加人10-15 毫升生理盐水或10%的林格氏液稀释,静置10分钟,即制成精液恳浊液。
2 .挤卵授精
(1)挤卵方法 抓住雌蟾蜍,使其背部对着右手手心,手指部分刚好在其前肢后面圈助蟾蜍体。另一人抓住后肢,使其伸展,然后用左手从蟾蜍体前部分轻加压力,并逐渐向泄殖腔方向移动,使卵从泄殖孔排出。
(2)授精 将雌蟾蜍的卵子挤入感配制好的精液悬浊液的器皿中,边挤卵边摇动器皿.或用羽毛等柔软物品轻轻搅拌,促使精子与卵子充分接触,提高受精机会。水温在 20 ℃ 一 30 ℃ 时,受精率最高。水温低于 18 ℃ 或高于 32 ℃ ,受精率都会降低。