母犬的发情周期及排卵时间与其他家畜有较大区别。尤其是排卵时间在发情期间的变化范围较大,常常造成养犬爱好者难以确定其准确的配种时间。下面就对母犬的发情周期及排卵时间的确定方法进行简单的介绍。
1 性成熟及适宜的配种年龄 母犬的性成熟因品种、饲养管理条件及地理环境不同而异,一般来说,小型犬达到性成熟的年龄早,而大型犬达到性成熟的年龄要晚一些。达到性成熟的时间一般在6-13月龄的范围内,配种时间应较性成熟的年龄晚些,在德国母犬配种的时间是由当地的育种协会决定的,通常在性成熟后的第2次发情时进行配种。
2 发情周期 大多数母犬的发情周期持续6―8个月,有的母犬的发情周期持续12个月也被认为是生理性的。发情周期分为发情前期、发情期、发情后期和间情期(休情期)。 从**内开始排出血液至接受交配的时间为发情前期,持续7-13天。母犬接受交配的时间为发情期,持续时间为3-21天,平均为9天左右。 一般将黄体功能期视为发情后期。大多数母犬在发情后期的2(1―5)天内仍然接受交配。发情后期的持续时间为9-12周,到这时黄体己完全溶解。但许多作者把发情后期并不定义为至黄体溶解时,而是至子宫内分泌活动完全停止时,此期持续时间为18-20周。发情后期至发情前期出现的一段时间为间情期,间情期内母犬虽然没有发情表现,但检查发现,在间情期内卵巢内有3-4次的卵泡发育及退化过程,血液中也有轻度的雌激素水平升高,此期持续1-3个月,最终进入发情前期。 卵泡发育期大约为10一12天,这期间雌激素水平不断升高。雌激素通过血液循环到达靶器官,造成阴门、**、子宫和输卵管的水肿及增生过程。黏膜上的血流量增多,子宫黏膜的血细胞渗出进入子宫腔并与子宫的分泌物相混合。卵泡期的末期可在血液中测到最高浓度的17β雌二醇含量。伴随着卵泡中雌激素合成的开始减少,在血液中出现由垂体前叶分泌的LH峰值,同时促卵泡素(FSH)也释放(FSH分泌的调节机制在犬的发情周期中尚不能被完全解释清楚)。LH峰值的出现与卵泡颗粒细胞黄体化的形成同时出现。大多数母犬在这个时候开始接受交配。LH峰值出现后的2天发生排卵。所排出的卵子2-3天后具有受精能力,伴随着排卵过程开始形成黄体并不断加强孕酮的产量。在孕酮的作用下,生殖道黏膜的肿胀情况开始减退,子宫血管壁开始变厚,进入子宫内分泌期。 表1 母犬发情各期的时间及主要特点 母大发情周期里激素的变化情况见图1(略)。
3 最佳配种时间的确定方法 若能在母犬的排卵时间予以配种的话,则能收到最佳的妊娠效果。但遗憾的是到现在为止在临床实践中尚未找到一种非常可靠的确定母犬排卵时间的方法。不过用几种方法进行综合判定常能取得较好的效果。间接确定母犬排卵时间的方法可通过观察母犬**黏膜的颜色的变化。**细胞学检查法及测孕酮的方法。若有好的B超诊断仪,亦可通过B超的方法观察母犬卵巢的排卯时间。值得提出的是单靠某一种方法尚不能肯定说出母犬的确切的排卵时间。见表2略。 从表1可以看出,若仅以发情前期、发情期的表现去推断母犬的排卵时间是很难确定的,因其变动范围很大。通过测**上皮的角质化亦不甚理想。而观察**黏膜细胞的浮冰样堆积及测孕酮量显得相对接近。但孕酮水平的开始升高,也有较难把握之处。因此,若想较难确的测定母犬的排卵时间,需要采取综合判定的方法。
4 发情检查
4.1 **检查 明道检查法对于确定母犬的发情具有一定的说服力。此法一般在站立保定下进行,需要大小适度的犬用开腔器及专用的光源。 首先用软纸将阴门周围擦干净,然后用左手的大拇指和食指把阴门口轻轻的翻开,以保证开腔器的前端直接与**黏膜接触。右手持已消毒完好的、与体温接近的、浇上一些生理盐水以保证润滑的开腔器缓缓的插入**。起初开腔器的方向朝上,然后水平向前推。达到一定深度后,在专用光源的帮助下,观察**黏膜颜色及分泌物等。 检查结果与判定:判定母犬发情期的不同时期主要根据**黏膜的颜色变化、教膜的肿胀情况及分泌物的多少。判定标难见表3略。 雌激素的增多是以上变化的主要原因。如**黏膜的水肿、增生及角质化等。在间情期**黏膜上皮只有2-3层,故黏膜上血管明显,呈玫瑰红。而在发情期,由于雌激素的作用,**黏膜上皮达到15-20层,故**黏膜颜色变白及形成特有的浮冰样堆积。
4.2 **细胞学检查 **上皮的组织学构建受雌激素的影响很大。在间情期**黏膜由2-3层非角质化的扁平上反覆盖。在雌激素的影响下细胞层增生且表层细胞角质化,最大程度的细胞增生可以达到20层。角质化的过程发生在发情期。从发情后期开始**上皮逐渐退化。**细胞学检查的目的即在此基础上达到认识发情周期的时间、确定排卯时间及了解卵巢功能状况等。 **细胞学检查可在做**检查的同时用无菌的棉拭子在**深处轻轻擦拭一下以采得**黏膜上皮(**前庭处的**黏膜上皮受雌激素的影响不大,故要在**深处采样),然后在载玻片上轻轻的滚一下。用帕帕尼科方法染色。但此法比较复杂,需要较多时间。目前德国汉诺威兽医大学繁殖医学院使用的是一种工厂化生产的专用染色剂,染色时非常方便,且效果非常好但其详细成分不清。**黏膜上皮亦可用姬姆萨方法染色、**细胞染色的判定标难主要是根据细胞的大小、形状、细胞核与细胞浆成分的比例及核内物质的存在与否。见表4略。 在间情期看到的是基底细胞或副基底细胞为主,这些细胞在发情前期消失,形成中间细胞和浅层细胞。除上皮细胞之外,在发情前期还有大量的红细胞渗出并能观察到少量的白细胞。 在发情前期向发情过渡时,浅层细胞增多,且逐渐的角质化。在接近排卵时看到的几乎都是角质化的表层细胞(80%-90%),这些细胞单个的平位于载玻片上。检验证明,大约75%的母犬在最大角质化程度后的第1天发生排卵。最大角质化程度持续1-6天,平均2.6天。 在发情期的后期表层角质层细胞几天之内逐渐脱落,**细胞抹片的角质化细胞相互连接。在这个再生过程中**黏膜层也出现了白细胞,在发情后期的2-4天内**抹片上可见到大量的白细胞,同时重新出现深层细胞。 在发情后期的早期做**细胞抹片间或可见到泡沫细胞(空泡细胞)及发情后期细胞(限制性基底细胞,其细胞浆中含有中性粒细胞)。后一种细胞为发情后期的典型特征。但在**炎时也有类似的现象。个别母犬在**黏膜的再生过程中常伴有大量炎性细胞的产生,引起脓性细胞的排出,此点要与子宫疾病区别开来。发情周期中**细胞抹片不同细胞的分布情况,见表5略。
4.3 孕围测定 到目前为止确定母犬排卵时间的范围最可靠的方法是测定孕酮。因为孕酮在发情前期即将结束时开始升高,一般在达到5ng/ml时即可排卵。临床实践中通常这样处理:母犬动情之后(开始进入了发情前期)可每2天进行一次**黏膜及**细胞学检查,只要**细胞角质化达到了50%,即可采血进行孕酮测定孕围量达到4-5ng/ml时,即可对母犬配种。发情周期中孕酮浓度的变化,见表6略。 4.4 B超 B型超声诊断技术亦可用于母犬的排卵鉴定。但对B超仪器的质量要求及操作人员的技术要求均很高,在德国这种方法已经作为一种排卵时间确定的重要辅助手段。