对出现大批死亡的雏鹧鸪进行细菌分离,结果分离到一株大肠杆菌和一株奇异变形杆菌,这两株细菌具有很强的致病性,药敏试验表明先锋霉素类和丁胺卡那霉素对这两种菌较敏感,现将流行病学和诊断情况介绍如下。
1 流行病学情况
近期某养户饲养的3000只雏鹧鸪,进苗后第1天就死亡200多只,第2天死亡约500只,第3~4天死亡近千只,第5天就诊时仅余下300多只。期间开食前饮过1.25%的葡萄糖水,第3天时用施得福进行过治疗,结果效果不佳,最终全部死亡。
2 病理剖检
肝肿大出血,其他病变因雏鹧鸪个体较小不易观察。
3 细菌分离
用病死鸪只的肝脏与心血接种于营养琼脂、血液琼脂、麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂培养基,37℃培养24小时,结果分离到两种菌,这两种细菌的特性如下。
3.1 大肠杆菌
3.1.1 培养及染色特性 在营养琼脂上形成圆形、边缘整齐、隆起、光滑、湿润、半透明、近似灰白色的中等大小的菌落,直径2~3mm。在鲜血培养基上,生长情况与普通琼脂相近,并呈现完全溶血;在麦康凯琼脂上,生长为中等大小的红色菌落;在伊红美蓝琼脂上呈现为暗黑色带金属光泽的菌落。取纯培养物进行革兰氏染色,结果为革兰氏阴性、多单个散在或成双排列、无芽孢,呈两极着色、长短不一的杆菌。
3.1.2 生化鉴定 将细菌的纯培养物,用梅里埃IDGNI+试剂卡在VITEK全自动微生物鉴定系统中进行鉴定,生化特性如表1所示。
鉴定结果:大肠杆菌(Es-cherichiacoli),鉴定值99%。
3.1.3 致病性试验 将培养基上的菌落用生理盐水洗下,配制成菌液浓度为3个麦氏比浊度(约为9亿/ml),接种健康小白鼠3只,每只腹腔接种0.3ml,接种后12小时小白鼠死亡2只,另一只在24小时死亡。注生理盐水对照组小白鼠完全健活。
3.1.4 药敏试验 用纸片法进行药敏试验,结果为丁胺卡那霉素、先锋必、先锋Ⅵ和菌必治高度敏感;复达欣、先锋V和妥布霉素敏感;四环素、庆大霉素和强力霉素低敏;氟派酸、环丙沙星、卡那霉素、万古霉素、苯唑青霉素、复方新诺明、链霉素和红霉素耐药。
3.2 奇异变形杆菌
3.2.1 培养及染色特性 在营养琼脂培养基上,菌落呈扩散生长,很快铺满整个培养基的表面,形成厚菌苔。在鲜血培养基上生长情况与普通琼脂相近,也呈现扩散样生长特性,并呈现完全溶血;在麦康凯琼脂上,生长为淡黄色菌落,没有扩散生长现象;在伊红美蓝琼脂上为淡红色中等大小菌落,也没有扩散生长现象。培养物有特殊的气味,取纯培养物进行革兰氏染色,结果为革兰氏阴性、多单个存在、中等大小的杆菌。
3.2.2 生化鉴定 将细菌纯培养物,用梅里埃IDGNI+试剂卡在VITEK全自动微生物鉴定系统中进行鉴定,生化特性如表2所示。
鉴定结果:奇异变形杆菌(Proteusmirabilis),鉴定值98%。
3.2.3 致病性试验 将培养基上的菌落用生理盐水洗下,配制成菌液浓度为3个麦氏比浊度(约为9亿/ml),接种健康小白鼠3只,每只腹腔接种0.3ml,接种后12小时小白鼠3只全部死亡。注生理盐水对照组小白鼠完全健活。
3.2.4 药敏试验 用纸片法进行药敏试验,结果为先锋必、复达欣、环丙沙星、庆大霉素、丁胺卡那霉素和妥布霉素高度敏感;先锋Ⅵ、先锋V和氟派酸敏感;链霉素低敏;卡那霉素、万古霉素、苯唑青霉素、菌必治、复方新诺明、四环素、强力霉素和红霉素耐药。
4 分析
大肠杆菌和奇异变形杆菌都为条件致病菌,在机体抵抗力下降时易发,其中大肠杆菌病较常见,并常与其他病原并发感染。奇异变形杆菌感染在山鸡中曾有报道,该报道中奇异变形杆菌可使4000羽1月龄山鸡在4天内大批死亡。此次导致1天龄雏鹧鸪接近100%死亡率的这两种细菌,经小白鼠接种试验均表现出很强的毒力,所以做好孵化房、运输工具和育雏用具的消毒工作对防止雏鹧鸪的细菌性感染十分重要。