1 狐人工采精
按摩法采精的操作过程:采精时先按摩公狐睾丸和会阴部,给狐一个采精信号。按摩数秒后,采精者将拇指、食指捏在公狐阴茎两侧,中指捏在阴茎腹面,捏住阴茎中部并沿阴茎纵向撸压和滑动阴茎包皮,对阴茎进行摩擦刺激。撸压开始时滑动速度要快一些,大约4~5次/秒,撸动幅度约7~8厘米。撸压5~7/秒后,阴茎勃起,随之阴茎中部的球状海绵体膨大。此时,将阴茎从公狐两后腿之间拉向后方,将包皮撸至球状海绵体后方继续撸压球状海绵体和后部的阴茎,撸压速度减慢,每10秒撸压12~13次,撸压球状海绵体时;稍用力些,如此反复撸压按摩(5~7秒或约10秒)直至公狐射精为止。为提高采精效果,按摩时应配合公狐性反射行为调整撸压按摩频率和力度,以刺激公狐排精。适度的撸压刺激公狐表现兴奋和舒适,刺激力度不够,公狐无性反射,阴茎勃起速度慢且不坚挺,而刺激力度过强时,公狐有痛感,性反射抑制。
精液的接取收集:在一只手按摩公狐阴茎即将开始射精时(公狐自主抖动动作停止,尾根部紧张下压),另一只手握住集精杯底部(用手掌保温)准备接取精液。公狐射精时,首先射出的是副性腺分泌物,白色透明尿样,可不接或接取弃之不用。后射出的是乳白色的精液,要及时接取在集精杯内。公狐射精过程中仍需对其按摩刺激,整个撸压采精过程大约需几十秒钟,最多不超过2分。公狐射精结束后待阴茎回缩时将包皮向阴茎头部撸挤,使阴茎复原,将精液迅速送往精检室内,放在37℃保温瓶或水浴锅内,并做好采精记录。
采精频度:指每周对公狐的采精次数。为了既能最大限度地采集公狐精液,又能维持其健康体况和保证精液品质,必须合理安排采精频度。公狐每周采精2~3次,如果连续采精2~3天应休息1~2天,不可随意增加采精次数以防精液品质降低,造成公狐利用率降低等不良后果。
2 精液的稀释保存
2.1 精液稀释
精液稀释液的检查:精液稀释液每批次都必使用前进行保存精子活力的检查。如精液稀释后3小时内精,精子活力≥0.7(在30~37℃检查)则稀释液的质量达到标准。不符合标准的必须舍弃。不同公狐个体的精子对稀释液的适应性有差别,故应多作几只观察。
稀释液的保管:稀释液应保管于4~5℃冰箱中,当天用多少吸取多少,并加温预热,剩余的稀释液弃去不用。
精液稀释的适宜倍数确定:按精液密度、活力和畸形精子率的检测结果计算出每毫升原精子中有效精子数,再按稀释后精液应含有的有效精子数(7 000万/毫升)和当日输精母兽数量计算出稀释倍数。稀释倍数=每毫升原精液中有效精子数/输精时每毫升稀释精液中所要求的精子数。
精液稀释的操作:事先把精液稀释液移至试管内,并置于盛有35~37℃的广口保温瓶或水浴锅内保存备用。稀释时先按适宜稀释倍数准确量取所需的稀释液,再将稀释液沿集精杯壁缓慢加入到精液中,轻轻摇匀,严禁稀释液快速冲入精液和剧烈震荡。
2.2 稀释精液的保存
稀释后的狐精液适于25~35℃条件下保存,保存时间不超过3小时。低温保存、冷冻保存技术尚不成熟(本文略)。
3 人工输精
3.1 输精器材的准备
输精前应做好输精器、阴道插管、注射器、70%的酒精棉球等准备工作。室内温度应保持在18~25℃,同时按常规进行室内外的消毒工作。所用授精器材如输精品、阴道插管等经事先严密消毒备用,使用时每狐1份。用后再统一消毒处理。所用5毫升注射器最好为医用菌一次性注射器。
3.2 做好母狐发情鉴定和疫病检查
发情鉴定和疫病检查的要求:为提高母狐授精率和杜绝疫病传播,母狐授精前必须进行发情鉴定和疫病检查,凡发情未在输精适机和有生殖道疾患者不予输精。
发情鉴定方法和适宜输精时间的确定:①外阴观察和试情法:外阴部逐渐肿胀、潮红、分泌物增多,用手触摸硬肿缺少弹性为发情前期;肿胀程度达最大并刚开始减退,用手触摸开始变软而有弹性时为发情期,此时经试情母狐站立和温顺的接受分狐爬跨则为输精适宜时机。②发情检测器检测法:母狐发情时用发情检测测定发情母狐阴道电阻值,电阻值逐渐增高至峰值为发情前期,达峰值后电阻值明显下降时为发情期。最佳输精时间的选择为蓝狐在电阻峰值下降第2天,银狐在电阻峰值下降当天。③阴道细胞学检查法;用棉签或吸管粘取或吸取阴道分泌物制成涂片,在200~400倍显微镜下观察,圆型细胞逐渐减少,角化细胞逐渐增多为发情前期;角化细胞占满视野,圆型细胞缺少为发情期即适宜输精期;角化细胞减少圆型细胞又重新出现时为发情后期。
3.3 人工输精(子宫内输精)操作
输精时两人配合操作:一人保定狐,一人输精。母狐的保定消毒:保定人员用保定钳保定母狐,一手握住母狐尾部使尾朝上,用0.1%~0.2%新洁尔灭消毒液消毒外阴部及其周围部分。
输精操作:①先将阴道插管插入母狐阴道内,其前端抵达子宫颈;左手虎口部托于母狐下腹部,以拇指、中指和食指摸到阴道插管的前端。②以左手拇指、食指、中指固定子宫颈位置,右手握持输精器末端把阴道插管内腔插入,前端抵子宫颈处调整输精的位置探寻子宫颈口。③左手、右手配合将输精器前端轻轻插入子宫体内1~2厘米,固定不动。由助手将吸有精液的注射器插接在输精器上,推动注射器把精液缓慢地注入子宫内,输精技术熟练者,也可事先将吸有精液的注射器插在输精器上,由输精者直接将精液输入。④向注射器内吸取精液时,应注意注射器的温度与精液温度一致,缓慢吸取至固定的刻度时,可再吸入少许空气,以保证输精时将所有精液输入子宫内,以防残留在输精针管腔内,造成浪费。⑤输精后轻轻拉出输精器,如果输精手法得当,母狐生殖道无畸形,则输精过程中母狐表现安静。⑥输入精液量约为0.7毫升,精子活力≥0.7,输入有效精子不少于7000万。⑦输精次数,一般连续输精2~3次,每日1次。初次输精误为假发情时,待发情后再输2~3次。
输精效果判定:①拉出输精器时手感觉有点阻力;②拉出输精器时无血液;③拉出输精器时精液不倒流;④镜检输精器内残留精精,精子活力不低于0.7。