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金针菇菌种生产繁殖技术

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1、金针菇菌种购置及生产用主要设施设备

1.1主要设施。接种室、培养室、操作室、贮藏室,其面积大小以生产规模而定。

1.2主要设备。超净工作台(或接种箱)、恒温箱、操作台、转椅、高压灭菌锅、常压灭菌锅、钢精锅、天平、台秤、量筒、玻璃瓶、试管等。

1.3菌种选购。选购优质高产、抗逆性强、性状稳定、生长快、纯度高、无杂菌、无病虫害的优良品系。

2、各菌种培养基选择制作

2.1母种斜面培养基的制作:

配方①马铃薯200--250克,琼脂20克、白糖20克、水1000毫升、pH值调至6.5。②马铃薯200--250克、琼脂20克、葡萄糖20克、水1000毫升、pH值调至6.5。③马铃薯200--250克、硫酸镁5克、白糖20克、维生素B1(B2)100毫升、磷酸二氢钾2.50克、琼脂20克、水1000毫升、pH值调至6.5。

制作:把马铃薯切成片放钢精锅中煮沸30分钟,用四层纱布过滤取汁,加入琼脂及其他料,搅拌溶解后加入糖,再加水至1000毫升,移入培养试管,容量为管长1/5。

2.2原种、栽培种培养基的制作:

配方

①木屑培养基:阔叶树木屑73%,蔗糖1%、细米糠(或麦皮)2.50%、碳酸钙1%、水料比1:1.20--1.30。

②棉子壳培养基:棉子壳88%、蔗糖1%、细末糖(或麦皮)10%,碳酸钙10%、水料比同。

③麦粒培养基:麦粒(或玉米粒也可以)99%碳酸钙1%,水料比1:1.20。

制作:按上述比例要求称取各样配料后混合。糖和化学物品用水溶化后加入料中拌匀,并将溶化用水量记入水料比中。棉籽壳在混合前拌水预湿;麦粒混合前浸泡再入锅煮熟,以麦粒不破肚为宜,捞出晾干后于其他料混合。全部料混合配好后装瓶,装量为瓶容量的1/3。

3、液体菌种制作

配方①葡萄糖3%、玉米粉1%、豆饼粉2%、碳酸钙0.20%、磷酸二氢钾0.10%、酵母粉0.50%、硫酸镁0.05%,将各成分溶于水中混匀,配制成悬浮液,煮沸30分钟后取上清液定溶,装入盛有10粒小玻璃珠的500毫升三角瓶中。

配方②马铃薯20%、蛋白质0.20%、葡萄糖20%、磷酸二氢钾0.05%、硫酸镁0.05%、氯化钾0.01%、马铃薯按常规方法提取滤液,添加其他成分后定溶装入瓶。

配方③玉米粉5%、酵母粉0.50%、蔗糖4%、碳酸钙0.20%、VB1毫克、制作方法与配方①相同。

3.1培养基灭菌与设施设备消毒

3.2母种斜面培养基。液体培养基高压灭菌用每千方厘米1.10千克,在121℃温度下灭菌30分钟,固体菌种培养基在灭菌后立即排放斜面,斜面长度占试管长度1/2为宜。

3.3原种、栽培种培养基。高压灭菌用

每千方厘米1.50千克压力,在121℃温度下灭菌1小时。麦粒为原料的培养基适当延长灭菌时间。也可用常压蒸汽灭菌,即在100℃温度下持续灭菌8小时。

3.4设施消毒。接种室、培养室、操作室用福尔马林加热熏蒸,也可用硫磺粉燃烧熏蒸,用量福尔马林每立方米空间10毫升,硫磺粉每立方米空间15克;用次氯酸钙(每千方米20--40克)水溶液,2%--3%来苏儿喷洒地面和墙壁。

3.5设备消毒。超净工作台及其各种工具用70%酒精或5%石碳酸0.25%新洁尔灭浸泡擦洗。接种前,打开紫外线灯灭菌15分钟。

4、菌种的接种与培养

4.1母种的接种与培养。接种时试管(瓶口)朝下并靠近酒精灯火焰处,用接种针把母种试管内的菌丝体连同原培养基切成0.50厘米x0.50厘米小块移入1支新试管培养基斜面上,塞紧棉花,放到23℃恒温箱或培养室中培养8--10天菌丝即长满斜面。

4.2原种、栽培种的接种与培养。用接种针把母种试管内的菌丝体挑取1平方厘米菌种块接入原种(或栽培种)瓶中的培养基上,同样瓶口靠近酒精灯火焰处,速度要快。接好后塞上棉花,放到23℃培养室中培养。

4.3液体菌种的接种与培养在高压灭菌后的液体培养基内接入2平方厘米生长旺盛的斜面母种一块,使汽生菌丝的一面向上悬浮于液面,在23℃温度下静态培养2--3天,再置于复式摇瓶机(振荡频率80--100次/分钟)上振荡培养3--4天,当液体呈浅黄色、清澈透明、具有香味时,移入消毒后的接种室,在酒精灯火焰口处将液体倒入经消毒的栽培种培养基表面,量为每瓶10--15毫升,然后置于23℃气温的培养室中培养27天左右即可成为栽培种使用。液体菌种的特点是在原种量小的情况下作为原种使用,采用液体培养基培养仅需1周左右,比培养固体原种可缩短4倍的时间,而且菌龄一致,菌丝健状,生活力旺盛。

5、金针菇菌种的保藏

5.1低温保藏。把长满斜面的菌种放在4℃冰箱中,每隔5个月再移植1次。

5.2常温保存。用木屑配制的培养基菌丝长满后用石腊封闭棉塞,常温下保存。

5.3液氮保藏。菌种贮藏在-130---193℃的液氮罐内。
 
 
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