一般认为芦荟年龄低的，其有效成分含量低，治病效果不佳。而且年龄越高治病效果越好。种植一年左右的芦荟就可采收。一般从植株下部开始采取成熟叶片，采收时可先在叶片下部叶鞘处轻划一刀，然后顺势剥下，这样，既不伤芦荟植株，又可保持叶片完整。生长良好的“上农大叶芦荟”，一年后就可长达80-90厘米，宽15厘米，单片叶子700克左右，每公顷土地一次可采30吨以上，每年可采4-5次。采下的叶片可放在塑料筐或纸板箱中。装箱(筐)时应注意勿使芦荟叶边缘齿互相刺伤叶片，造成叶汁外流和叶片出伤斑。为了避免叶边缘齿互相刺伤，装箱(筐)时可将芦荟叶片分层排列整齐，在各层之间放隔层的稻草或铺上旧报纸，每箱(筐)也不宜装得太多，以免叶片互相挤压损伤。芦荟叶片压伤后，会流出汁液，在空气中氧化成红黑色，不仅影响外观，也增加工厂加工处理的困难。在采收、包装和运输过程中都要十分细致认真。如发现有个别损坏的芦荟叶片，应及时挑出，以免扩散损坏其他的叶片。同时各箱(筐)堆码装车时也不能互相挤压，避免压坏芦荟叶片。
采收时间不拘季节，全年可采。一般可在早晨进行采收，尽可能于当天将新鲜芦荟叶片送工厂加工，这对提高芦荟产品质量是非常重要的。另外，采收数量应与工厂加工处理能力相适应，采收太多，造成芦荟叶片处理不及时，影响芦荟新鲜程度。采收太少，芦荟加工单位开工不足，同样也是一种浪费。所以，尽量使种植、采运、加工相互配合，协调一致，使各环节衔接良好，减少浪费。采收后的剩余部分可按扦插繁殖方法换盆或换地。
