猪流感诊断方法研究进展

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猪流感(Swineinfluenza,SI)的病原为猪流感病毒(Swineinfluenzavirus,SIV),属于正黏病毒科。一般呈多形态,直径约100nm,有囊膜,囊膜上有突出的糖蛋白,通常称为纤突。纤突有2种,一种是血凝素(hemagglutinin,HA),另一种是神经氨酸酶(neuramidinase,NA)。HA和NA可作为确定流感病毒亚型和毒株的主要依据。HA在适宜条件下能凝集某些动物的红细胞,在感染的过程中与识别吸附靶细胞有关。NA既能使吸附在红细胞上的病毒脱离红细胞,也能使病毒从感染的细胞中释放出来。同种病毒的血凝素抗体可以防止病毒吸附细胞,在防止流感病毒的感染中起重要作用,而神经氨酸酶的抗体能限制病毒感染细胞。除了HA和NA这2种病毒蛋白以外,还有基质蛋白(M),核蛋白(NP),多聚酶(PA、PB1、PB2)以及非结构蛋白(NS)。

猪A型流感病毒容易在10日龄~12日龄的鸡胚尿囊腔或羊膜腔内培养,也适应原代猪胎肾,猪肺和猪气管上皮细胞,犊牛肾细胞,犬及人源细胞系,以及鸡胚成纤维细胞、犬肾细胞、猪睾丸细胞上培养。研究发现某些SIV毒株不能在鸡胚中增殖,因此只能利用细胞来增殖病毒。

仅依据临床症状和流行病学特点很难对该病做出确诊,确诊还需借助实验室诊断技术。目前,用于猪流感病原和抗体检测的方法主要有病毒的分离鉴定、血凝和血凝抑制试验、神经氨酸酶抑制试验、中和试验、琼脂凝胶扩散试验、免疫荧光法、酶联免疫吸附试验、聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光定量PCR和NASBA(nucleicacidsequence?basedamplification,NASBA)法等方法,这些方法在诊断该病中发挥重要的作用。




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