直接观察法:发情开始后12-18小时;接受其它牛爬垮,由烦躁转为安静;粘液量少,浑浊状或透明而浓稠。阴道检查法:外阴肿胀开始消失,子宫颈口呈大蒜瓣状、粉红或带紫褐、湿润、开张良好。直肠检查法:通过直肠检查触摸两侧卵巢上的卵泡发育情况来确定母牛是否发情,根据卵泡是否突出于卵巢表面及大小、弹性、波动性和排卵来判断是否发情及配种或输精的适期。发情初期卵巢有所增大,卵泡部分突出于卵巢表面其直径在8毫米以下,较硬;到卵泡成熟期,卵泡呈球突出于卵巢表面,其直径可达10-24毫米,卵泡壁变薄,富有弹性,有一触即破之感。同时,触摸子宫角后子宫有收缩(紧张)感。卵巢上有直径在1.5厘米左右的卵泡,并有一触即破之感。