直接观察法：发情开始后12-18小时；接受其它牛爬垮，由烦躁转为安静；粘液量少，浑浊状或透明而浓稠。
阴道检查法：外阴肿胀开始消失，子宫颈口呈大蒜瓣状、粉红或带紫褐、湿润、开张良好。
直肠检查法：通过直肠检查触摸两侧卵巢上的卵泡发育情况来确定母牛是否发情，根据卵泡是否突出于卵巢表面及大小、弹性、波动性和排卵来判断是否发情及配种或输精的适期。发情初期卵巢有所增大，卵泡部分突出于卵巢表面其直径在8毫米以下，较硬；到卵泡成熟期，卵泡呈球突出于卵巢表面，其直径可达10-24毫米，卵泡壁变薄，富有弹性，有一触即破之感。同时，触摸子宫角后子宫有收缩（紧张）感。卵巢上有直径在1.5厘米左右的卵泡，并有一触即破之感。