鉴定奶牛发情常有3种方法，分别为外部观察法、阴道检查法和直肠检查法。
一、外部观察法
饲养员、兽医师、配种员等，最好是专门的配种员，对进入初情期的育成牛、分娩后的泌乳牛进行经常观察，作详细记录。重点是食欲、行为、产量、外阴等变化。
二、阴道检查法
有经验的配种员、兽医师利用专用的开膣器，打开母牛阴道，进行检查。发情母牛阴道黏膜充血潮红，有流动性透明黏液，子宫颈肿胀，子宫颈外口松弛并开张，同时可见较多的黏液附在子宫颈口及其边缘。不发情的母牛阴道黏膜苍白，较干燥，子宫颈紧闭。怀孕母牛阴道黏膜干燥呈桃红色，子宫颈外口呈苍白色并收缩突出，并有黏膜覆盖或黏液团堵塞。
三、直肠检查法
此法是隔着直肠壁触摸卵巢及卵泡的大小、形状和变化状态等，判断母牛的发情程度和排卵时间。特别适用于外部发情征状不明显（安静发情、不完全发情）奶牛的发情鉴定。